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        2. 親和標簽抗體系列的試用裝活動來啦??!

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          ◆DYK標簽:DYKDDDDK


          DYK標簽是識別DYKDDDDK肽鏈的單抗??捎糜跈z測大腸桿菌、酵母、哺乳動物細胞中表達的DYKDDDDK標簽融合蛋白。


          圖片.png


          將表達3×DYKDDDDK標簽融合蛋白A的質粒轉染至HEK293細胞中,經過24 h培養后,隨機選取其中的克隆細胞。將選取的克隆細胞用RIPA緩沖液進行裂,對所得的細胞溶解液用Western blotting檢測。

          分別用Wako(克隆號 1E6)(產品編號:018-22381)抗體和A公司抗體進行Western Blot檢測。

          與A公司抗體相比,Wako(克隆號 1E6)抗體識別DYKDDDDK的特異性更高。





          A公司產品和Wako產品在Western blotting檢測中的靈敏度比較


          圖片.png


          Lane 1:293T細胞溶解液

          Lane 2:瞬時表達蛋白A-DYKDDDDK的293T細胞溶解液

          Lane 3:瞬時表達蛋白B-DYKDDDDK的293T細胞溶解液

          封閉:含5% 脫脂奶的TBS-T、4℃,過夜

          抗體反應:2 h、室溫

          發光劑:ImmunoStar? LD

          檢測:LAS-3000、曝光時間15 min

          Wako 1E6-HRP比A公司產品有更高的靈敏度!!



          ◆PA標簽系統?標簽序列【GVAMPGAEDDVV】

           

          ● 超高親和性抗體,實現高回收率、高純度純化

          ● 通過樹脂再生,降低運行成本

          ● 在動物細胞表達系(HEK293T細胞、CHO細胞等)中,有效純化蛋白

          ● PA標簽系統是使用可識別肽標簽(12個氨基酸殘基)的單抗(NZ-1)。Wako開發了對應的親和性純化標簽系統。

          ● NZ-1單抗對PA tag具有高親和性和特異性,可應用于Western blotting、細胞流式分析、免疫組化(ICC)。

             通過免疫沉淀,可純化PA標簽融合蛋白以及樹脂再生。

          ● PA標簽系統,可一步純化高純度PA標簽融合蛋白。



          使用案例:Western blotting


          281572250504.jpg


          Lane 1

          一抗:抗IDH1抗體(RcMab-1), 1 μg/mL

          二抗:抗大鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

           

           Lane 2

          一抗:抗PA tag抗體, 1 μg/mL

          二抗:抗大鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

           

          Lane 3

          一抗:抗DYKDDDDK標簽抗體, 3.5 μg/mL

          二抗:抗小鼠IgG-HRP標簽, 1000倍稀釋

           

          上樣量:各10 μg

          曝光時間:10 min



          ◆6×His標簽:HHHHHH (6×His)


          可用于檢測His(6×His)標簽融合蛋白??寺√柌煌?,識別端的特異性、應用也有所不同。



          圖片.png


          克隆號

          識別端

          Western blotting

          Immunoprecipitation

          ELISA

          產品編號

          N端

          C端

          N端

          C端

          9F2

          C端

          ND

          +++++

          ND

          ++

          -

          010-21861

          21-48

          N端及C端

          +++

          ++++

          +++

          +++

          017-23211

          28-75

          N端及C端

          ++

          ++

          +++++

          +++++

          014-23221



          B公司產品和Wako產品各克隆號的Western blotting檢測功能比較


          圖片.png


          N端His:HEK293T表達的6×His-Protein Z, 1×105 cells

          C端His:Protein P-6×His+CHO細胞溶解液, 1×105 cells

          一抗:1 μg/mL

          二抗:抗小鼠IgG抗體, 5000倍稀釋液

          可確認其具有比B公司產品同等甚至更高的靈敏度。



          GFP tag: Green Fluorescent Protein (GFP)


            可識別Green Fluorescent Protein(GFP)的抗體。GFP是可實時檢測目標蛋白局部或細胞、細胞器中的標簽蛋白,可應用于各個研究領域。

           


          c-Myc標簽:EQKLISEEDL


          可識別人c-Myc 來源(410-419aa)多肽EQKLISEEDL單抗。


          圖片.png

          抗c-Myc, 單抗(017-21871

          抗體濃度:0.25 μg/mL

          抗原量:對10 ng c-Myc標簽重組蛋白進行電泳操作。

          用10000倍稀釋的抗小鼠IgG-HRP抗體進行檢測。



          GST標簽:Glutathione-S-transferase


          可識別Glutathione S-transferase(GST)單抗。

           

           

          親和性標簽抗體結合瓊脂糖珠


          圖片.png


          <使用載體量>

          抗DYKDDDDK標簽抗體瓊脂糖珠(Wako): 20 μL/assay

          A社 Affinity Beads: 20 μL/assay


          <抗原添加量>

          含DYKDDDDK標簽融合蛋白的大腸桿菌細胞裂解液20 mg/assay


          <免疫沉淀條件>

          4℃、3 h


          <洗脫方法>

          150 ug/mL DYKDDDDK肽 (產品編號:044-30951) 20 μL/assay

          → 4℃、孵化30 min

          添加20 μL/assay 的2% SDS sample buffer → 煮沸5 min。


          <SDS-PAGE>

          樣品電泳量:10 μL


          <檢測方法>

          銀染法

          配制可過量表達DYKDDDDK標簽融合蛋白(約19 kDa)的大腸桿菌裂解液,分別用本產品和A公司產品免疫沉淀后,用DYKDDDDK肽進行抗原洗脫。將得到的抗原樣品用SDS-PAGE分離、銀染色后,比較抗原回收率。


          可確認比A公司產品具有同等甚至以上的抗原回收性能??!



          ◆產品列表


          產品編號

          產品名稱

          應用

          子類
          克隆號

          包裝
          (試用)

          高特異單抗

          010-21861

          Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9F2)
          6×His單抗(9F2)

          WB

          小鼠IgG1
          9F2

          20 μg

          014-23221

          Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(28-75)
          6×His單抗(28-75)

          WB,IP

          小鼠IgG3?κ
          28-75

          20 μL

          017-23211

          Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(21-48)
          6×His單抗(21-48)

          WB、IP、ELISA

          小鼠IgG1?κ
          21-48

          20 μg

          018-22381

          Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal AntibodyD
          YKDDDK標簽單抗

          WB、IP、FCM、ChIP

          小鼠IgG2b
          1E6

          20 μg

          017-21871

          ANTI c-Myc, Monoclonal 
          Antibodyc-Myc單克隆抗體

          WB、IP

          小鼠IgG1
          9E10

          20 μg

          012-20461

          Anti Green Fluorescent Protein, Monoclonal Antibody (Anti GFP,   MoAb)
          綠色熒光蛋白單克隆抗體

          IHC

          小鼠IgG2?κ
          mFX73

          20 μL

          HRP標記單抗

          014-21901

          Anti c-Myc, Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
          過氧化物酶標記的c-Myc單抗

          WB

          小鼠IgG1
          9E10

          10 μL

          015-22391

          Anti DYKDDDDK tag, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
          過氧化物酶標記的DYKDDDK標簽單抗

          WB

          小鼠IgG2b
          1E6

          10 μL

          010-23181

          Anti 6×Histidine, Monoclonal Antibody(9C11), Peroxidase   Conjugated
          抗6×His,單克隆抗體(9C11),過氧化物酶偶聯

          WB

          小鼠IgG1
          9C11

          10 μL

          011-21891

          Anti Glutathione S-transferase, Monoclonal Antibody, Peroxidase   Conjugated
          抗谷胱甘肽S-轉移酶,單克隆抗體,過氧化物酶偶聯

          WB

          小鼠IgG2b
          5A7

          20 μL

          015-25951

          Anti PA tag, Rat Monoclonal Antibody, Peroxidase Conjugated
          抗 PA 標簽, 大鼠 單克隆 抗體, 過氧化物酶標記

          WB

          大鼠IgG2a
          NZ-1

          20 μL

          抗體結合瓊脂糖珠

          012-22781

          Anti DYKDDDDK tag Antibody Beads
          抗DYKDDDDK標簽抗體瓊脂糖珠

          IP

          小鼠IgG2b
          1E6

          200 μL

          019-23391

          Anti 6×Histidine Antibody Beads
          抗6×His抗體瓊脂糖珠

          IP

          小鼠IgG3?κ
          28-75

          400 μL

          014-23081

          Anti HA Antibody Beads
          抗HA抗體瓊脂糖珠

          IP

          小鼠IgG1
          4B2

          200 μg



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